摘要以ICR纯种小鼠的骨髓细胞为实验材料,用诱变剂环磷酰胺(CPP)诱发的微核(MN)和姐妹染色单体互换(SCE)作指标,对部分常用的滋阴补阳方药进行抗突变研究,发现六味地黄汤、金匮肾气丸等8种方药对环磷酰胺诱导的MN有不同程度的抑制作用,其中4种方药对环磷酰胺诱导的SCE有明显的抑制作用。滋阴补阳的食物
主题词@滋阴补阳方突变/药物作用骨髓细胞/药物作用
分子生物学认为基因突变是疾病发生的根源之一。在这种对疾病发生学认识的基础上,国际上出现了在亚细胞及分子层次上筛选抗变剂的研究动向。我们已完成的3个省级课题[1~3],对常用的补益类单味药及补气养血方药进行了抗突变研究,为了达到补益药抗突变研究的完整性,同时考虑到中药复方能表现整体效应,比单味药更接近临床,我们进行了滋阴补阳方药抗突变的研究。滋阴补阳的饮食制作方法添加日期阅读数:304“爱情菜”是根据各种食物的搭配,形成了一些特殊的功效,特别是在滋阴壮阳,增加性功能方面有一定作用的滋阴补阳的汤通过实验发现六味地黄汤、金匮肾气丸、桂枝甘草汤理中汤、益胃汤增液汤、养阴清肺汤、三仙汤对环磷酰胺诱导的微核(MN)都有不同程度的抑制作用,并且六味地黄汤、金匮肾气丸、桂枝甘草汤、理中汤对环磷酰胺诱导的姐妹染色单体互换(SCE)也有明显的抑制作用报告如下。
1材料与方法
11实验用药:六味地黄汤按《小儿药证直诀》方,金匮肾气丸按《金匮要略》方,桂枝甘草汤、理中汤按《伤寒论》方益胃汤、增液汤按《温病条辨》方,养阴清肺汤按《重楼玉钥》方、二仙汤按《妇产科学》方,以上中药均由南京中医药大学门诊部提供,经鉴定符合《中华人民共和国药典》规定。
12药液配制:每种方药均加适量的蒸馏水浸泡2小时,煮沸30分钟滤出头煎,药渣加蒸馏水适量,煮沸30分钟,滤出液与头煎合并,加热浓缩至100ml。
13试剂:环磷酰胺(CPP)购自上海华联制药公司。秋水仙素为上海化工试剂厂生产。药用活性碳为武汉市凌云化工厂生产。5-溴脱氧嘧啶核苷(5-Brdu)为瑞士Fluka公司产品。
14实验动物:ICR纯种小鼠,体重20~22g雌雄不限,由南京中医药大学实验动物中心提供。
15实验方法:将小鼠分为5组每组5只。阴性对照组予蒸馏水灌胃05ml/只/日共10天。阳性对照组在第9天时腹腔注射CPP,余同阴性对照组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ用药组药液剂量分别为0125ml/只05ml/只,共灌胃10天,第9天腹腔注射CPP。CPP剂量MN为40mg/kg,SCE为20mg/kg。
MN制片及观察:将5组小鼠处死取骨髓细胞置生理盐水中,离心(1000r/min)8分钟,怎么滋阴补阳啊!该问题的相关标签:最佳答案王云医师医生认证:贵州毕节信用度:1761医生详情向其提问回复时间:投诉去上清液,加37℃预温的,滋阴补阳中医教你滋阴补阳好方法中医教你滋阴补阳好方法医生在线网2009-08-膏药贴的穴位·关于前列腺和尿道炎如何治疗上海各大医院专家门诊信息肿瘤病人置37℃低渗8分钟,加入固定液(甲醇、冰醋酸为3∶1)1ml,离心后去上清液,再加入固定液3ml混匀,连续固定两次后气干法滴片,用Giemsa染液(pH64)染色8分钟,每组标本统计5000个细胞,计算出微核率,方法同文献[4]。
SCE制片及观察:5组小鼠处死前24小时腹腔注射活性碳吸附的处死前4小时腹腔注射秋水仙素(5mg/kg),SCE制片过程基本同MN法,低渗时间为30分钟较MN法长,且所制片子需置37℃老化1~2天后置56℃水浴锅上,滋阴补阳用氯化钠枸橼酸钠液浸润,30W紫外光(灯距玻片6cm)照射30分钟,用3%Giemsa染液(pH为68)染色8分钟。于油镜下每组小鼠观察100个左右有差别染色的中期分裂相,统计出SCE均数,作统计学分析。
2结果
21MN结果:六味地黄汤、金匮肾气丸等8种方药对环磷酰胺诱导的MN的抑制作用见表1。阳性对照组与阴性对照组相比微核率有显著差异(P<005),说明CPP有致突变作用,而用六味地黄汤、金匮肾气丸理中汤、桂枝甘草汤增液汤、益胃汤二仙汤、养阴清肺汤处理以后,再加CPP则这些用药组的微核率与阳性对照组相比有不同程度的降低,说明这些方药对环磷酰胺诱导的微核有一定程度的抑制作用。
22SCE结果:在发现上述8种方药具有抑制MN升高功效基础上,我们以SCE为指标进行实验,发现六味地黄汤、金匮肾气丸理中汤、桂枝甘草汤又对环磷酰胺诱导的SCE有明显的抑制作用见表2。阳性对照组与阴性对照组的SCE频率有显著差异(P<005),进一步说明CPP的致突变作用,4种方药的各个剂量组SCE频率均与阳性对照组有显著差异,表明它们有明显的抑制SCE升高的作用。
表18种方药对环磷酰胺诱导的MN的抑制作用
组名动物数观察细胞数MN数微核率(‰)
阳性对照组阴性对照组养阴清肺汤ⅠⅡⅢ理中汤ⅠⅡⅢ二仙汤ⅠⅡⅢ金匮肾气丸ⅠⅡⅢ桂枝甘草汤ⅠⅡⅢ益胃汤ⅠⅡⅢ六味地黄汤ⅠⅡⅢ增液汤ⅠⅡⅢ与阳性对照组比较P<005
表24种方药对环磷酰胺诱导的SCE的抑制作用(±s)
组名动物数SCE总数SCE均数/中期分裂相
阳性对照组(Ⅰ±0279
阴性对照组(Ⅰ±0119*
六味地黄汤Ⅰ±0149*
Ⅱ±0167*
Ⅲ±0201*
金匮肾气丸Ⅰ±0194*
Ⅱ±0153*
Ⅲ±0146*
桂枝甘草汤Ⅰ±0368*
Ⅱ±0149*
Ⅲ±0143*
阳性对照组(Ⅱ±0225
阴性对照组(Ⅱ±0108△
理中汤Ⅰ±0197△
Ⅱ±0183△
Ⅲ±0143△
*与阳性对照组(Ⅰ)比较P<005;△与阳性对照组(Ⅱ)比较P<005
3讨论
DNA分子遗传信息的完整正确是机体维持正常生命活动的重要保证,当机体受到一定量诱变剂(如环磷酰胺等)作用时,DNA可形成交叉联结,发生断裂等[5],DNA的结构和功能会受到损害,机体则有可能出现疾病,若在症状还未显出之前用抗变剂进行纠正,便可将疾病消灭于萌芽状态[67]。我们近年来的研究表明,一部分补益类单味药和方药具有拮抗染色体突变的作用滋阴补阳;摘要:以阴阳失衡的角度论述多囊卵巢综合征的病因、病机、治则,并结合临床实践说明滋阴补阳序贯治疗,可以使多囊卵巢综合征患者达到阴阳平衡,恢复月经周期这种拮抗作用表现在能抑制环磷酰胺诱导的MN和SCE,但这些药的拮抗作用强弱不一,有的同时具有上述两种抑制作用,病友网讨论板首页营养保健论坛如何才能做到滋阴补阳,延年益寿(转到动态网页)rss上一主题下一主题主题:如何才能做到滋阴补阳,延年益寿复制链接|有的只有其中一种作用。
六味地黄汤、金匮肾气丸等为补益类方药,临床上具有治疗阴虚、阳虚病证的功效,通过实验我们认为这种“补”的现代科学基础可能在于:(1)细胞外作用:直接灭活外源性诱变物,阻止其作用于细胞,或者通过对自由基的清除减少自由基对DNA影响;(2)细胞内作用;对染色体起保护作用,使其免受损伤(扶正固本),或激活DNA修复系统,提高DNA修复能力,使受损的DNA得到修复,恢复正常。
基金项目:国家中医药管理局课题王明艳(南京中医药大学基础医学院,南京市汉中路282号210029)
赵凤鸣(南京中医药大学基础医学院,南京市汉中路282号210029)
张旭(南京中医药大学基础医学院,南京市汉中路282号210029)
吴海涛(南京中医药大学基础医学院,南京市汉中路282号210029)
赵鸣芳(南京中医药大学基础医学院,南京市汉中路282号210029)
周坤福(南京中医药大学基础医学院,南京市汉中路282号210029)
徐力(南京中医药大学基础医学院,南京市汉中路282号210029)
沈建伟(南京中医药大学基础医学院,南京市汉中路282号210029)
参考文献
1,宋为民,贾敏,法京,等补气药对环磷酰胺诱发SCE的抑制作用癌变、畸变、突变,1991,3(4):24
2,王明艳,贾敏,吴洁,等补气养血方药对环磷酰胺诱发的微核的抑制作用中国优生与遗传杂志,1996,4(1):60
3,滋阴补阳的菜贾敏,王明艳,怎么滋阴补阳作者:宋氏皮肤…文章来源:宋氏皮肤性病网点击数:更新时间:怎么滋阴补阳?1、采日精法阴历每月初一、二、三日太阳初升时,面对太阳静坐法京,等温阳药对环磷酰胺诱发MN的抑制作用南京中医药大学学报,滋阴补阳汤1995,11(6):36-37
4,伏晓敏,乐俊仪聚乳酸和乳酸-乙醇酸共聚物的致变性研究癌变、畸变、突变,1990,2(1):14-16
5,刘群良,张克纯,阳力争,等抗衰延寿方对环磷酰胺所致小鼠染色质结构与功能损害的影响湖南中医学院学报,1994,14(3):41-43
6,曹群立,王慧敏,俞顺章,等几种中药抗诱变作用的研究癌变、畸变、突变,1990,2(2):24-28
7,许俊才抗突变研究近况癌变、畸变、突变,1993,5(1):36